Determinarea glucozei - studopediya

Mai mult de 90% din carbohidrații solubili cu greutate moleculară mică au asupra glucozei din sânge, în plus, cantități mici pot fi prezente fructoză și pentoze, și în patologie și galactoză.

Hiperglicemia observată în multe stări patologice: diabet, pancreatita, traume și comoție cerebrală, encefalită, mukovistsiidoze, stimulare mentala, otrăvire cu monoxid de carbon, mercur. În funcție de severitatea nivelului de glucoza diabet jeun este. sub ușoară - 6.7-7.8 mmol / l.

Hipoglicemia este o supradoză de insulină, boli pancreatice, boli maligne, anumite leziuni hepatice infecțioase și toxice, gipotirioze, boli ereditare asociate cu un deficit de enzime.

Glicozurie observate în diabetul zaharat, hiperplazie adrenală, insuficiență renală, sepsis, tumori cerebrale si traume, otrăviri morfina, pancreatita, sindromul Fanconi.

sarcină unică glucoză determină la pacienții diabetici o creștere lentă curba glicemic, faza hipoglicemică de obicei nu este detectată, reducerea este curba foarte lent. Zahărul de urină, de asemenea, determinată.

Este de asemenea important pentru diagnosticul de diabet zaharat pentru a determina concentrația de insulină și peptidă-C. In molecula preinsulina este o peptidă C care constă din 31 de aminoacizi, care leagă lanțurile A și B. În sinteza de insulină, el a tăiat peptidazei și cu insulina devine in sange. insulina nu este activă înainte de clivaj al peptidei. Acest lucru permite pancreasului pentru a forma stocurilor de insulină. C-peptid și insulină sunt eliberate în cantități egale, pot fi evaluate, astfel, în peptidă C a secreției de insulină. Dar să fie conștienți de faptul că rata de eliminare din circulație a acestor substanțe este diferită. C-peptid în sânge este mai lungă decât este insulina stabil si insulina este de 5 ori. In C-peptid sănătoasă este în intervalul 1-4 ng / ml, insulina de 6 la 27 mU / ml. Creșterea nivelului de C-peptid poate indica hipertrofia celulelor B, un diabet zaharat insulino-dependent (NIDDM). Coborârea peptidei C indicat în diabetul zaharat insulino-dependent (IDDM).

Diagnosticul de diabet se va aplica definiția albuminei în urină. Urina de zi cu zi a oamenilor sănătoși pot fi detectate până la 8 mg de proteină. In diabetul de proteine ​​este crescută la 20-300 mg / l.

Un criteriu suplimentar asupra riscului de diabet zaharat este de a determina metabolismul lipidelor. Nivelul trigliceridelor din sânge variază creștere paralelă a zahărului din sânge.

Metodele de determinare a glucozei sunt împărțite în trei grupe:

· Metodele care utilizează reacțiile de culoare care implică produse formate prin încălzirea carbohidraților cu acizi puternici.

metode de cercetare de enzime combină de înaltă precizie, acestea se bazează pe una din cele două reacții - sau glyukoooksidaznoy hexokinazei. Când glucoza hexochinază este mai întâi fosforilat în detrimentul ATP datorită acțiunii hexochinaza; esterul glucozo-6-fosfat care rezultă în prezența glucozei-6- fosfat dehidrogenază recuperează NADP, a cărei valoare este determinată de creșterea absorbției luminii în regiunea ultraviolet.

Metoda mai ușor realizabilă glucozoxidază, în care glucoza-oxidaza oxidează glucozei cu oxigen atmosferic pentru a forma peroxid de hidrogen, a cărei valoare este determinată, fie prin mijloace chimice sau prin capacitatea sa de a oxida în prezența diaminelor peroxidaza pentru a forma produse colorate.

Metoda Principiu: Glucoză oxidază oxidează glucoza pentru a produce peroxid de hidrogen, care, sub acțiunea peroxidazei oxidează ortotolidin pentru a forma un cromogen albastru.

clorură de 1.Natriya 9 g / l (0,9 g nasi în 100 ml apă).

2. Zinc sulfat 50 g / litru: 5g de sulfat de zinc a fost dizolvat în apă, volumul a fost ajustat la 100 ml.

3. Hidroxidul de sodiu, 0,3 mol / l: preparată prin dizolvarea a 1,2 NaOH în 100 ml apă.

4. Ortotoliidin 1% soluție: 1 g de medicament se dizolvă în 100 ml alcool absolut.

5. tampon acetat pH 4,8: ​​Se amestecă 4 părți acid acetic 0,25 N și 6 părți de acetat de sodiu 0,25 N.

7. peroxidază de hrean.

8. Reactiv de lucru în 80 ml tampon de acetat se dizolvă 2 mg de glucoză oxidază și 1 mg de peroxidazei, s-a adăugat 1 ml de soluție ortotolidina 1%, se agită și volumul a fost ajustat cu tampon până la 100 ml.

9. soluții de glucoză de calibrare. În primul rând, o soluție stoc având o concentrație de 50 mmol / l, la care au fost dizolvate 180 mg de glucoză în 20 ml acid benzoic. Din această soluție se prepară soluțiile de calibrare de lucru, care conține 3 mmol / l; 6 mmol / l; 9 mmol / l; 12 mmol / l; 15 mmol / l; 18 mmol / l; 21 mmol / l, pentru care iau 0,6 ml; 1,2 ml; 1,8 ml; 2,4 ml; 3,6 ml; 4,2 ml din soluția stoc a fost ajustat cu o soluție saturată de acid benzoic și 10 ml. Aceste soluții conțin glucoză la aceeași concentrație în care este în sânge.

Proceedings definiții: Tubul de centrifugare este realizată din 1,1 ml de clorură de sodiu, 0,4 ml dintr-o soluție de sulfat de zinc și 0,4 ml de soluție 0,3 N NaOH, agitată; în care gelul este format foarte subțire hidrat de oxid de zinc, eliberat 0,1 ml de sânge sau de soluție de calibrare snava agitată și după 10 minute. centrifugat la 3000 rot / min timp de 10 min.

La 1 ml de supernatant se adaugă 3 ml de reactiv de lucru și amestecat ușor. După 15 minute, colorația dezvoltă și cuvele fotometrice cu lungime de cale optică de 1 cm, cu un filtru roșu (625 nm) față de un martor care da simultan cu testele de lucru, dar în loc să ia de sânge fiziologic soluție de clorură de sodiu. La prepararea curbei de calibrare pentru probele de sânge prelevate 0,1 ml din soluția de calibrare corespunzătoare.

Valoarea jeun normală: 3,5 5,7 mmol / L (60-100 mg în 100 ml).