Transformare - enciclopedie chimică
TRANSFORMARE (lat transformatio -. De conversie) in genetica moleculara. schimbare în comunicare ereditara celulelor prin infiltrarea ADN străin.
Ca rezultat al transformării unei celule destinatar poate dobândi și transfera trasatura de rezistenta la puii lor, a anterior lipsesc, dar disponibile din celulele donatoare (de exemplu. O genă de rezistență la antibiotice).
T ransformatsiya au mai mult. bacterii (pneumococi, streptococi, bacteriile hemofilie WIDE, bacili) este procesul natural care apar la p. populații. La aceleași celule. capabil să absoarbă și să încorporeze în ADN-ul său cromozomul heterolog. sunt capabili t. sunat. competență (stand-by), care vine într-o anumită perioadă a ciclului de viață (faza de creștere final). Dezvoltarea competențelor poate merge pe tipul „cascadă“: celule. devin competente, nizkomol mediu izolat. proteine (de ex., se numește. factor de competență), k-ing adsorbit pe alții. cuști. De asemenea, le face competente.
mecanismul de transformare cuprinde o adsorbție ireversibilă a celulelor donator ADN-ului (de ex. secretat în mediu ca rezultat al lizei celulare) pe celula recipient-dressing sti. ADN bun adsorbit numai. având mol. în greutate de cel puțin 300 de mii. Cele mai multe bacterii pot adsorbi ADN-ul de orice origine. In bacteriile hemophilic adsorbit numai astfel de fragmente de ADN. la- transporta specificitate. secvență de 11 pb. caracteristic numai pentru ADN-ul bacteriilor. Specific fiecărei specii. Adsorbtia este, de asemenea, caracteristica de Neisseria gonorrhoeae. Adsorbția se realizează pe spec. receptori. în cazul în care ADN-ul se leaga de proteine speciale si „retractat“ în celulă. Astfel, una dintre catenele ADN este distrus datorită activității nucleaza a proteinelor cu legare de ADN. iar celula este furnizat ADN deja monocatenar. Ea a învăluit imediat molecule proteice. la- proteja ADN-ul celular de exonucleaze și să contribuie la contactul cu cromozom. urmată de recombinare cu ea. In acest proces de transformare este terminată.
ADN-ul poate fi introdus în bacterii artificial. În acest scop, de exemplu. coliformi (pentru care nici o transformare naturală caracteristică) este răcit și tratat cu soluții de CaCI2 sau RbCl sau supuse congelare la temperaturi joase t-pax urmat de decongelare. Celulele devin astfel permeabile pentru ADN-ul. totuși mecanismul de transformare, în acest caz, este total diferit decât cel descris mai sus.
Bacteriile pot intra prin transformare și ADN plasmide. Rezultatul final este apariția celulelor. care transportă o plasmidă străină în stare autonomă, sau încorporat în cromozom. Mecanismul de penetrare în celulă un ADN plasmid este același ca cromozom. Cu toate acestea, apariția ADN monocatenar, și altele. Procesele legate de absorbție, astfel încât „strica“ plasmid. probabilitatea de reconstrucție corectă a formei inelare replicare scăzute (forme monomerice ale plasmidelor de transformare celulară nu este eficient). Prin urmare, utilizarea multimerică (format din mai multe plasmidelor.) Formează plasmidă sau cu repetă nucleotide directe. de ce șansă de a „construi“ o creștere completă plasmidă.
Utilizarea plasmid transformare poate fi realizată protoplaste (celule cu un perete celular de la distanță), la- apoi regenerate în celule complet. ADN-ul. penetrant în ele, aproape nu este deteriorat și rămâne dublu catenar. Transformarea plasmid în multe privințe similar cu t. Chemat. transfecție. atunci cand bacteriile consuma ADN fagic (virusul bacterian), preselectare particulelor de fag. Acest ADN în codurile bacterie pentru producerea de noi particule de fag. la- distruge celula bacteriană și apoi du-te afară.
T ransformatsiya drojdie m. B. realizată numai prin mijloace artificiale. În acest scop, protoplaști sau celule tratate cu săruri de metale alcaline. ADN-ul pătrunde în protoplaști de drojdie sunt, de asemenea, sub influența electrice. biți (m. numit. electroporare).
T ransformatsiya celulele mamifere este posibilă numai în mod artificial prin microinjecția de ADN străin în nucleul embrionilor, somatic. Celulele sau absorbția ADN-ului de către celulele din culturi de țesuturi. In cele mai multe cazuri, ADN-ul a fost adăugat la un amestec de CaCl2 p-ra și tampon fosfat; format precipitat fin la-ing adsorbit și absorbite de către celule. Este de asemenea posibilă introducerea ADN-ului într-un lipozom, sau prin utilizarea ca ADN vector conținând virus moderat prezent cu includerea de fragmente animale genom ADN.
Celulele vegetale nu sunt capabile să absoarbă ADN. Odată cu transformarea celulelor de plante dicotiledonate folosind protoplaști regenerează. absorbi ADN-ul liber și ADN. încapsulat în lipozomi. Regenerează transformat formă protoplaști t. Chemat. calus tesut. un roi apoi format plantă. Et al. metodă pentru introducerea de ADN străin în genomul unei astfel de creșteri. Celulele este o infectie naturala a bacteriei Agrobacterium tume-faciens, purtător sau TI- Ri-plasmidă. Aceasta bacterie este capabil să penetreze creșterea intactă. celule. și apoi eliberat plasmid integrate în genom. In monocotiledonate, aceste plasmide nu funcționează în celulă. pentru transformarea lor de a recurge la transferul direct de ADN în protoplaste. folosind electroporarea. Transformarea plantelor poate fi realizată prin intermediul „shot“ în celule accelerat particulele de tungsten sau aur. la la- depuse anterior DNA.
T ransformatsiyu utilizate în tehnicile de inginerie genetică pentru introducerea genelor într-o celulă. care să conțină informații predeterminate.
T ransformatsiya a fost descoperit în 1928 de către F. Griffith. In 1944, G. Avery și colaboratorii au arătat că transformarea anumitor patogene pentru bacterii nepatogene este realizată prin transferarea unui prim genom ADN. eliberat din celulele tulpini virulente.
Lit. Kozhina T. I. Zaharov I. A. "Succesele ale biologiei moderne", 1987, t. 104, c. 1 (4), p. 3-21; Prozorov A. Transformarea bacteriilor, M. 1988; Sybenga J. "Teor. Appl. Genet.", 1983, v. 66, № 3-4, p. 179-201; Kucherlopati R. Skoultchi A. I. "CRC rev critice. Biochem.", 1984, v. 16, № 4, p. 349-79. AA Prozorov.